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Sub-2μｍカラムでは実現困難な高理論段 (出荷時約5万段)
伝統的な250x4.6mmメソッドの分離改善に
多成分分離，異性体分離など，分離優先のメソッドに
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微粒子充てん剤を長いカラムに充てんすることは容易ではありません。 sub-2μｍ粒子を充てんした最長カラムは一般的に150mmで理論段数も3万段程度ですが，これ以上長いカラムへの充てんはかなり困難です。
理論的にはsub-2μｍカラムは3μｍカラムよりも高性能とされていますが，これは製造技術を考慮しない場合に限られます。現実的には理論段数やピーク形状は，充てん技術（スラリー組成やパージ方法など）に大きく左右されます。
さらには微粒子になるほど充てんが難しくなるため，相対的カラム性能は低下します。
また微粒子カラムほど高価であることや，超高圧分析でカラムにかかるストレスにより耐久性が低下することなど，運用コストも懸念されます。
IMTAKTの3μｍ充てん剤はsub-2μｍ充てん剤に比べてかなり低圧であり，長いカラムへの充てんに有利な粒子設計となっています。
これにより250-500mm長カラムへの充てん技術も早くから確立されています。そして出荷時理論段数は250x4.6mmが約5万段，500x4.6mmで最高10万段，という高理論段カラムの安定供給が可能となっています。 |
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Sub-2μｍカラムによる分離が大きく改善できるとは限らない
(TI709E) |
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図(TI709E)のように，アイソクラティック分析における1.7μｍカラムの理論段数はIMTAKT3μｍカラムに比べて約1.5倍であり理論値の1.8倍には及びません。
特徴的なことは分離ピークが若干テーリングしているために分離度は大差がないことです。 一方でカラム圧力には2倍以上の大差があります。
分離にあまり差がないのであれば，高圧によるHPLC装置トラブルを避ける上でも3μｍカラムの選択が運用上は現実的かもしれません。 |
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Sub-2μｍカラムは粒子径に反比例した理論段数が出るとは限らない
(TI708E) |
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カラム理論段数は粒子径に反比例します。 理論上では1.7μｍカラムは3μｍの1.8倍の理論段数を示すはずです。
図(TI708E)では1.7μｍ 100mm長カラムに対して，1.5倍長い3μｍ 150mm長カラムを比較しています。
理論どおりであるなら，1.7μｍカラムの方が理論段数が高いはずですが，インタクトの3μｍカラムの方が高性能である結果となっています。
分離度もカラム圧力も3μｍカラムに優位性があります。
このように「圧力が高いカラムほど分離性能も高い」という考え方は必ずしも正しくはありません。 |
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IMTAKT3μｍカラムと他社1.7μｍカラムの性能比較
(TI707E) |
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1.7μｍカラムに比べて1.5倍長い3μｍカラムを1.5倍の流量に設定すると分析時間が同程度になります。 図(TI707E)のように，保持は同等で，理論段数，分離度，圧力いずれも3μｍカラムの方に優位性があります。
これは分析流量を変えても同様の結果となります。
分離の改善にはsub-2μｍのような粒子径を小さくすることよりも，3μｍ粒子を用いて250mmのような長いカラムを用いることがより実践的と考えられます。 |
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250x4.6mm高理論段カラムの流量・圧力と理論段数の関係
(TI071J,E) |
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インタクトの3μｍ粒子 Cadenza CD-C18
250x4.6mmカラムは流量（圧力）を下げても理論段数はそれほど低下しません。UHPLCを必要とせずHPLCでも高性能カラムを使うことができます。 |
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250x4.6mm高理論段カラムの繰り返し注入耐久性
(TI064J,E) |
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インタクトの3μｍ, Cadenza CD-C18 250x4.6mmカラムは繰り返し注入による耐久性に優れています。 |
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250mmカラムの有用性：
150mmカラムの分離改善 |
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異性体の分離改善や多成分系分離には250mmカラムが有効です。
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テプレノン(胃潰瘍治療薬)異性体分離改善
水100%系移動相におけるカラム性能
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250mmカラムの有用性： 5μｍカラムの分離改善 |
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伝統的に用いられてきた5μｍ 250x4.6mmカラムを分離改善するときに3μｍ 同サイズのカラムが効果的です。
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界面活性剤の鎖長認識
ステロイドの分離改善
試薬不純物の分離改善
フラーレンの分離改善
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3μｍ 250x4.6mmカラムの特徴的なアプリケーション |
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IMTAKT 3μｍ
250mm長カラムによるアプリケーションをご紹介します。
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ドキセピン異性体のLC-MS分析
(Cadenza CX-C18)
エナジードリンク成分のLC-MS分析 (Unison UK-Amino)
イヌリン (Cadenza CW-C18)
ポリスチレンスルホン酸 (Cadenza
CW-C18)
糖アルコール類のLC-MS分析 (Unison UK-Amino)
単糖類・二糖類のLC-MS分析 (Unison
UK-Amino)
米糠油に含まれる機能性成分 (Cadenza CD-C18)
コーヒー成分 (Scherzo SW-C18)
ペプチド分離に与えるTFAの影響 (Presto
FF-C18)
遺伝子組み換えヒト血清アルブミン rHSA (Presto FF-C18)
ヒト血清IgG抗体の精密分離 (Presto FF-C18)
蛍光誘導体化LC-MS/MS法によるプロテオーム解析
(Intrada WP-RP)
希少糖 (Unison UK-Amino)
グルコース二糖異性体 (Unison
UK-Amino)
ステロイドホルモン
(Cadenza CL-C18)
副腎皮質ホルモン (Cadenza CL-C18)
トリプシン分解ペプチド (Unison UK-C18)
精製魚油中のDHAグリセリドを含む脂質
(Cadenza CD-C18)
医薬品候補化合物の溶出に関するカラムサイズ比較 (Cadenza CD-C18)
ムラサキイモ中のアントシアニン (Cadenza
CD-C18)
ラベンダー精油
(Cadenza CD-C18)
乳脂肪/トリグリセリド (Cadenza CD-C18)
DNPH-アルデヒド，ケトン
(Cadenza CD-C18)
メチル馬尿酸異性体 (Cadenza
CD-C18)
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3μｍ粒子技術を極めた
500x4.6mm 10万段(*)カラム |
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(*) 当社出荷時最高理論段
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